In vitro lytic efficiency of Staphylococcus aureus bacteriophages in bacteria from bovine mastitis: a meta-analysis / Eficiência lítica in vitro de bacteriófagos de Staphylococcus aureus em bactérias de mastites bovina: uma meta-análise

ABSTRACT: Bacteriophages have been investigated as alternative to the treatment of bacterial infections, including bovine mastitis, in production animals. In this meta-analysis, we evaluated in vitro efficiency of phages of Staphylococcus aureus against S. aureus, which is involved in the etiology of bovine mastitis. Seventeen studies were included and the bacterial lytic activity was extracted using proportion analysis. The lytic efficiency of phages was obtained in this meta-analysis using a random-effects model [significant difference (P<0.05)]. Forest plots were used to graphically represent the efficiency of phages on bacterial isolates. Most phages (e.g., CS1, DW2, ΦSA011, ΦSA012, ΦSA022, ΦSA023, ΦSA024, ΦSA025, ΦSA037, ΦSA038, ΦSA039, ΦSA041, ΦSA042, ΦSA043, ΦSA044, MSA6, Ufv-aur2 to Ufv-aur11, SAH-1, SPW, vB_SauM_JS25, SaPh1 to SaPh6, SA, SANF, SA2, ΦSA012, ΦSA039, phi11, phiIPLA88, phiIPLA35, phiIPLA-RODI, phiIPLA-C1C, SAJK-IND, vBSP-A1, vBSP-A2, STA1.ST29, EB1.ST11, EB1.ST27, Remus, and ISP) were efficiently lytics or infected most S. aureus isolates, demonstrating 80% (P<0.05) lytic efficiency. The phages SA, SANF and SA2, also demonstrated lytic activity or infected the non-Staphylococcus aureus and Macrococcus caseolyticus isolates. In this meta-analysis, we compared and demonstrated the in vitro efficiency and host range of S. aureus phages. Additionally, the phages represent an alternative to be researched to treat bovine mastitis in dairy cattle caused by the prevalent microorganism, S. aureus.

RESUMO: Os bacteriófagos têm sido investigados como alternativa ao tratamento de infecções bacterianas em animais de produção, incluindo a mastite bovina. Nesta meta-análise, avaliamos a eficiência in vitro de fagos de Staphylococcus aureus contra S. aureus envolvidas na etiologia da mastite bovina. Dezessete estudos foram incluídos e a atividade lítica bacteriana foi extraída usando análise de proporção. A eficiência lítica dos fagos foi obtida nesta meta-análise, usando um modelo de efeitos aleatórios (diferença significativa (P <0,05)). Os gráficos de Forest plots foram usados para representar graficamente a eficiência dos fagos em isolados bacterianos. Os fagos avaliados, na sua grande maioria, (por exemplo, CS1, DW2, ΦSA011, ΦSA012, ΦSA022, ΦSA023, ΦSA024, ΦSA025, ΦSA037, ΦSA038, ΦSA039, ΦSA041, ΦSA042, ΦSA043, ΦSAf e U0f, ua04 SPW, vB_SauM_JS25, SaPh1 a SaPh6, SA, SANF, SA2, ΦSA012, ΦSA039, phi11, phiIPLA88, phiIPLA35, phiIPLA-RODI, phiIPLA-C1C, SAJK-IND, vBSP-A1, vBSP-A2, STA1.ST29, EB1.ST11, EB1.ST27, Remus, e ISP) foram eficientemente líticos ou infectaram a maioria dos isolados de S. aureus, demonstrando 80% (P < 0,05) de eficiência lítica. Os fagos SA, SANF e SA2 também demonstraram atividade lítica ou infectaram os isolados Staphylococcus não-aureus e Macrococcus caseolyticus. Nesta meta-análise, comparamos e demonstramos a eficiência in vitro e gama de hospedeiros de fagos de S. aureus. Adicionalmente, os fagos representam uma alternativa a ser pesquisada para o tratamento da mastite bovina em gado leiteiro causada pelo microrganismo prevalente, ou seja S. aureus.

In vitro algicidal effect of polypyrrole on Prototheca species isolates from bovine mastitisAlgicidal activity of polypyrrole on Prototheca spp.

Algae of the genus Prototheca are microorganisms involved in the occurrence of diseases in humans and animals. In bovine species, Prototheca spp. cause environmental mastitis, productive losses in dairy herds, mainly leading to the discard of infected cows. Currently, there are no effective anti-Prototheca spp. drugs to combat this infection. Thus, the search for an efficacious therapy for Prototheca spp. infections have become essential. Highly soluble polypyrrole (Ppy) is a molecule with known antimicrobial activity. This study aimed to characterize Prototheca spp. isolates from bovine mastitis as well as to evaluate the susceptibility profile and to verify the morphological alterations on Prototheca spp. isolates treated with Ppy. In this research, 36 Brazilian isolates of Prototheca spp. were characterized by restriction fragment length polymorphism polymerase chain reaction (RFLP-PCR) assay for the mitochondrial cytB gene. Additionally, Ppy algicidal activity against these isolates of Prototheca spp. was assessed by minimal microbicidal concentration method in microplates. Further, scanning electron microscopy (SEM) was performed in order to verify the morphological alterations on Prototheca spp. isolates in response to Ppy. The isolates were characterized as belonging to Prototheca zopfii genotype 2 (35/36) and Prototheca blaschkeae (1/36). Ppy had an algicidal effect on all isolates tested at concentrations ranging from 15.625 µg ml-1 to 62.5 µg ml-1. SEM showed changes on planktonic and sessile P. zopfii, including a decrease of the number of cells with the presence of an amorphous substance involving the cells. The algicidal activity of Ppy suggests the therapeutic potential of this molecule in the prevention and treatment of Prototheca spp. in bovine mastitis.

Characterization of intestinal Escherichia coli isolated from calves with diarrhea due to rotavirus and coronavirus.

PURPOSE: To address more information about changes in commensal Escherichia coli during virus intestinal infection, we characterized 30 faecal E. coli isolates from calves (21 to 60 days old) with diarrhea due to rotavirus and coronavirus, which received, before diagnosis, tetracycline, gentamicin and enrofloxacin drugs. METHODOLOGY: Clermont's phylogenetic classification; presence of genes for curli, cellulose, fimbriae (F4, F5, F6, F18, F41); and antimicrobial susceptibility were used to characterize the isolates. Disk diffusion technique and PCR were used as methodologies. RESULTS: E. coli isolates from calves with diarrhea were phylogenetically classified as B1 (70%, 21/30), B2 (3.33%, 1/30), C (3.33%, 1/30), D (3.33%, 1/30), E (13.33%, 4/30) and unknown (6.7 %; 2/30), whereas E. coli isolates from the control group were classified only as B1 (83.3%, 25/30), E (10 %; 3/30) and unknown (6,7 %; 2/30). E. coli isolates from calves with diarrhea showed a much higher resistance profile with 16 (53.3%) multiresistant isolates. Only isolates (30%-9/30) from diarrheic calves were also positive for fimbriae, specifically 16.7% (5/30) for F5 and 13.3% (4/30) for F18. CONCLUSION: To sum up, E. coli isolates from calves with diarrhea showed differences in relation to the control group, confirming changes in commensal E. coli during virus intestinal infection. It can be emphasized that some care should be taken to manage diarrheic calves: the pathological agent must be diagnosed prior to treatment; antibacterial treatment should be with antimicrobials with a different mechanism of action; and finally, treated animals should be maintained separately from others because they can carry micro-organisms with a resistant profile.

Biofilm formation by Prototheca zopfii isolated from clinical and subclinical bovine mastitis in distinct growth conditions under different dyes / Formação de biofilme por Prototheca zopfii isolados de mastite bovina clínica e subclínica em distintas condições de crescimento sob diferentes corantes

ABSTRACT: Prototheca spp. have been reported as an emergent environmental mastitis pathogen in several countries. Biofilm formation is a significant factor associated with different degrees of virulence developed by many microorganisms, including Prototheca spp. The present study aimed to compare two growth conditions and two staining dyes to determine which combination was more appropriate to evaluate qualitatively and quantitatively the production of biofilm by P. zopfii. Biofilm formation was evaluated in polystyrene microplates under static and dynamic growth conditions and staining with crystal violet or cotton blue dye. All P. zopfii isolates from cows with mastitis were classified as biofilm-producers in all growth conditions and staining. The cotton blue dye proved to be more appropriate method to classify the intensity of P. zopfii biofilm production.

RESUMO: Prototheca spp. tem sido relatado como um patógeno ambiental causador de mastite bovina em vários países. A formação de biofilme é um fator associado a diferentes graus de virulência desenvolvidos por muitos microrganismos, incluindo Prototheca zopfii. O presente estudo teve como objetivo comparar duas condições de crescimento e dois corantes para determinar a combinação mais adequada para avaliar qualitativa e quantitativamente a produção de biofilme por P. zopfii. A formação de biofilme foi avaliada em microplacas de poliestireno sob condições estáticas e dinâmicas de crescimento e coloração com cristal violeta ou azul de algodão. Todos os isolados de P. zopfii de vacas com mastite foram caracterizados como produtores de biofilme, independentemente das condições de crescimento e coloração. O corante azul de algodão demonstrou ser o método mais adequado para classificar a intensidade de produção de biofilme de P. zopfii.

Molecular characterization of virulence genes cctA, nanA, and fliC in Clostridium chauvoei from Rio Grande do Sul and São Paulo State, Brazil / Caracterização molecular dos genes de virulência cctA, nanA e fliC em Clostridium chauvoei isolados no Rio Grande do Sul e São Paulo, Brasil

ABSTRACT: Clostridium chauvoei toxin A (CctA), neuraminidase (NanA), and flagellin (FliC) proteins contribute to the pathogenicity of Clostridium chauvoei, the causative agent of blackleg in cattle. The aim of this study was to analyze the genetic variability of cctA, nanA, and fliC genes in C. chauvoei isolates from the Rio Grande do Sul and São Paulo state- Brazil, during different sampling periods. The presence of these genes was verified through PCR amplification and partial gene sequencing of 17 strains. Alignment of PCR amplicons combined with bioinformatics analysis was used in an attempt to study the variability across C. chauvoei solates. The similarity among the partial sequences of cctA and nanA genes was 100%. The sequencing of fliC revealed three different paralog alleles of flagellin, and two strains were seen to be polymorphic, with amino acid alterations in the predicted protein. Overall, this study indicates that strains of C. chauvoei isolated in Brazil are highly conserved with respect to the virulence factors evaluated.

RESUMO: Toxina A de Clostridium chauvoei (CctA), neuraminidase (NanA) e flagelina (FliC) são proteínas que contribuem para a patogenicidade de Clostridium chauvoei, o agente causador do carbúnculo sintomático em bovinos. O objetivo deste estudo foi analisar a variabilidade genética dos genes cctA, nanA, e fliC em C. chauvoei isolados em diferentes períodos no Rio Grande do Sul e São Paulo. A presença destes genes foi verificada pela amplificação dos produtos da PCR e sequenciamento parcial dos genes de 17 cepas. Os alinhamentos da amplificação dos produtos da PCR combinados com a análise de bioinformática foram utilizados na tentativa de avaliar a variabilidade dos genes entre os isolados de C. chauvoei. A similaridade do sequenciamento parcial dos genes cctA e nanA foi 100%. O sequenciamento do fliC revelou três alelos paralogos diferentes de flagelina e duas cepas mostraram polimorfismos, causando alterações na sequência de aminoácidos. As cepas de C. chauvoei isoladas no Brasil mostraram-se altamente conservadas em relação aos fatores de virulência avaliados neste estudo.

Blackleg in cattle: current understanding and future research needs / Carbúnculo sintomático: compreensão atual e futuras necessidades de pesquisa

ABSTRACT: Blackleg is an endogenous acute infection that principally affects cattle, whose etiologic agent is the anaerobic bacterium Clostridium chauvoei. In recent years, the major virulence factors of C. chauvoei have been discovered and described. However, the pathogenesis of blackleg in cattle, and in particular, the movement of the pathogen from the point of entry to the affected tissues is not yet fully elucidated. Disease control is based on appropriate management and vaccination. This review summarizes the latest research findings that contribute toward the understanding of the disease in cattle, provide a foundation to preventive strategies, and identify future research needs.

RESUMO: O carbúnculo sintomático é uma infecção endógena, aguda, que acomete principalmente bovinos, cujo agente etiológico é a bactéria anaeróbica Clostridium chauvoei. Recentemente, os principais fatores de virulência do C. chauvoei foram descobertos e descritos. Contudo, a patogênese do carbúnculo sintomático em bovinos, especialmente a circulação do patógeno desde o ponto de entrada até os tecidos acometidos ainda não está completamente elucidada. O controle desta enfermidade é baseado em medidas adequadas de manejo e vacinação. Esta revisão reúne as mais recentes descobertas que contribuíram para o entendimento da doença em bovinos, fornece embasamento para medidas preventivas e aponta futuras necessidades de pesquisa.

Temporal profile of antimicrobial resistance exhibited by strains of Staphylococcus spp. isolated from cases of bovine mastitis for 20 years (1992-2011) / Perfil temporal da resistência antimicrobiana exibido por cepas de Staphylococcus spp. isoladas de casos de mastite bovina durante 20 anos (1992-2011)

Records of in vitro susceptibility tests performed between 1992 and 2011 were retrospectively reviewed in order to evaluate the dynamic profiles of possible changes in antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. isolated from milk samples of cows with mastitis during two decades. The results of 2,430 isolates tested by disk diffusion technique for susceptibility to oxacillin, penicillin, ampicillin, cephalexin, norfloxacin, tetracycline, sulfazotrim, gentamicin, and neomycin were analysed. Comparisons were performed between the percentages of resistance to antimicrobials and their classes and also between the decades studied. Additionally, the possible tendency or changes in the behaviour of these pathogens against the major drugs used in the last two decades were evaluated using regression analysis. The highest rates of resistance (P<0.0001) were observed for the beta-lactams (34.3%), with exception of cephalexin (6.9%), and for the tetracyclines (28%). Similar resistance rates (7.6% to 15.7%) were observed among the other drugs. Regression analysis showed a reduction in resistance to penicillin and ampicillin throughout the period, whilst for oxacillin and neomycin a decrease in the resistance was observed during the first decade, followed by an increase. A trend towards decreased resistance was found for sulfazotrim, whereas for the other antimicrobials no decrease was observed. The results indicated no trend towards increased resistance for most antimicrobials tested. Nevertheless, it is necessary to monitor the resistance patterns of these pathogens in order to save these drugs as a therapeutic reserve.

Os registros de resultados de testes de suscetibilidade in vitro realizados no período de 1992 a 2011 foram revisados, retrospectivamente, a fim de avaliar a dinâmica de possíveis mudanças dos perfis de resistência de isolados de Staphylococcus spp., oriundos de amostras de leite de vacas com mastite ao longo do tempo. Os resultados de 2430 isolados testados pela técnica de difusão em disco para oxacilina, penicilina, ampicilina, cefalexina, norfloxacina, tetraciclina, sulfazotrim, gentamicina e neomicina foram analisados. Comparações entre as médias de resistência para os antimicrobianos e suas respectivas classes e em relação ao período analisado foram estabelecidas. O comportamento da resistência para cada antimicrobiano foi avaliado por meio de análise de regressão. As maiores taxas de resistência (P<0,0001) foram observadas para os betalactâmicos (34,3%), com exceção da cefalexina (6,9%), e tetraciclina (28%). Frente aos demais fármacos, os isolados apresentaram médias de resistência semelhantes entre si (de 7,6% a 15,7%). A análise de regressão demonstrou redução da resistência para penicilina e ampicilina ao longo do período analisado. Para a oxacilina e a neomicina, houve um decréscimo da resistência dos micro-organismos testados durante a primeira década; entretanto, houve um aumento no segundo período. Em relação ao sulfazotrim, foi verificada uma tendência à diminuição da resistência dos isolados, ao passo que, para os demais antimicrobianos, nenhum comportamento foi destacado. Os resultados não indicaram tendência de aumento da resistência dos isolados de Staphylococcus spp. para a maioria dos antimicrobianos testados. Contudo, é necessário monitorar os padrões de resistência destes patógenos, a fim de que estes fármacos sejam preservados para garantir uma reserva terapêutica.

Differences in the antimicrobial susceptibility profiles of Moraxella bovis, M. bovoculi and M. ovis

The aim of this study was to determine the differences in the antimicrobial susceptibility profiles of Moraxella bovis, M. bovoculi and M. ovis. Thirty-two strains of Moraxella spp. isolated from cattle and sheep with infectious keratoconjunctivitis were tested via broth microdilution method to determine their susceptibility to ampicillin, cefoperazone, ceftiofur, cloxacillin, enrofloxacin, florfenicol, gentamicin, neomycin, oxytetracycline and penicillin. The results demonstrated that Moraxella spp. strains could be considered sensitive for most of the antimicrobials tested in this study, but differences between the antimicrobial susceptibility profiles of these three Moraxella species were found. M. bovis might differ from other species due to the higher MIC and MBC values it presented.

Susceptibility profile of Brazilian Rhodococcus equi isolates against azithromycin, clarithromycin and erythromycin / Perfil de susceptibilidade de isolados brasileiros de Rhodococcus equi frente à azitromicina, claritromicina e eritromicina

Rhodococcus equi infection treatment is usually a macrolide (azithromycin - AZM, clarithromycin - CLR and erythromycin - ERY) and rifampicin combination. However, resistance cases have been reported, especially for ERY. In view of the need of a study about Brazilian isolates susceptibility profile, this study aimed to characterize the minimum inhibitory concentration (MIC) of the macrolides - AZM, CLR and ERY - against 44 R. equi isolates. It was found all isolates CLR and AZM sensitive; however, for ERY, 27% (12/44) were classified as intermediate sensitivity. R. equi Brazilian isolates used here showed a large susceptibility profile, except against ERY, for which it was observed some resistance evidence. In order to avoid failures in the equine rhodococcosis therapy it was highlighted the importance of microbiological culture and antimicrobial susceptibility testing in vitro before beginning treatment.

No tratamento de infecções por R. equi, usualmente emprega-se uma combinação de macrolídeos (azitromicina - AZI, claritromicina - CLARI e eritromicina - ERI) e rifampicina. Todavia, casos de resistência frente a esses antimicrobianos vêm sendo reportados, especialmente à ERI. Tendo em vista a necessidade de um estudo sobre o perfil de susceptibilidade de isolados brasileiros, buscou-se verificar a concentração inibitória mínima (CIM) de AZI, CLARI e ERI frente a 44 isolados de R. equi de diferentes origens. Todos os isolados analisados demonstraram perfil de sensibilidade à AZI e CLARI; em contraste, frente à ERI, 27% (12/44) apresentaram sensibilidade intermediária. A fim de evitar falhas no tratamento da rodococcse equina, destaca-se a importância da cultura microbiológica e a realização de testes in vitro de susceptibilidade antimicrobiana de R .equi antes do início do tratamento.

Genotypic and phenotypic detection of efflux pump in Rhodococcus equi

The req_39680 gene, associated to a putative efflux system, was detected in 60% (54/90) of R. equi isolates by PCR. The phenotypic expression of efflux mechanism was verified in 20% of the isolates using ethidium bromide. For the first time, the expression of efflux mechanism was demonstrated in R. equi.

Campylobacter fetus em bovinos no estado do Rio Grande do Sul / Campylobacter fetus in cattle from Rio Grande do Sul state, Brazil

A campilobacteriose genital bovina (CGB) é uma doença infectocontagiosa causada por Campylobacter fetus, determina infertilidade temporária, endometrite leve e aborto em fêmeas, além de aumentar o intervalo entre partos. A ocorrência de CGB entre rebanhos no Brasil tem variado muito entre as diferentes regiões. Com isso, o objetivo deste trabalho foi identificar, por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR), a ocorrência de amostras positivas para C. fetus, oriundas de bovinos, no período de 1999 a 2010, no Rio Grande do Sul, e analisar a positividade em machos e fêmeas. Foram utilizadas 816 amostras procedentes de 37 municípios, localizados predominantemente nas mesorregiões sudoeste e centro ocidental rio-grandense, das quais 480 aspirados prepuciais (92 provenientes de duas centrais de inseminação artificial e 388 de estabelecimentos de criação - monta natural), 324 aspirados cervicais e conteúdo abomasal de 12 fetos bovinos abortados. Como resultado, 10,9% das amostras (89/816) foram positivas para C. fetus. Quando analisados os resultados em relação à origem das amostras, 6,5% (6/92) das coletadas de machos de centrais de inseminação foram positivas, e das obtidas de touros utilizados em monta natural, 9% (35/388). Já entre as fêmeas, esse percentual foi de 13,6% (44/324) e, nas amostras obtidas de fetos abortados, 33,3% (4/12) foram positivas. Quando analisados os 91 estabelecimentos de criação com monta natural e os 37 municípios, foram positivos 44,0% (40/91) e 63,2% (24/37), respectivamente. Com isso, foi demonstrada a importância da CGB para os rebanhos bovinos, e uma maior ocorrência de amostras positivas em fêmeas, quando comparadas às amostras provenientes de machos.

Bovine genital campylobacteriosis (BGC) is an infectious disease caused by Campylobacter fetus, which determines temporary infertility, mild endometritis, miscarriage in females and also increases the calving interval. The occurrence of BGC in the Brazilian herds has varied widely among regions. The aim of this study was to identify by polymerase chain reaction (PCR) the occurrence of C. fetus in bovines from Rio Grande do Sul (RS), Brazil using samples collected from1999 to 2010. A total of 816 samples from 37 counties localized predominantly in the Southwest and Central Western regions of the RS state were analyzed. Four hundred eighty preputial aspirated samples (92 from artificial insemination centers and 388 from farms that use natural mating) and 324 cervical aspirates and abomasal contents of 12 aborted fetuses were analyzed. As result, 10.9% (89/816) were positive for C. fetus. When the results were analyzed in relation to its origin, 6.5% (6/92) of the males samples from insemination centers were positive, and the ones from natural mating 9% (35/388) were positives. For the females, this percentage was 13.6% (44/324) of positivity, and the samples from the aborted fetuses 33.3% (4/12) were positive. When the 91 farms that used natural mating and the 37 counties were analyzed, it showed a positivity rate of 44.0% (40/91) and 63.2% (24/37), respectively. This study shows the importance of BGC for bovine herds, and a larger occurrence of positive samples among females when compared to male.

Acute myonecrosis in horse caused by Clostridium novyi type A

The objective of this study was to describe the first report involving a case of equine acute myonecrosis caused by C. novyi type A with an emphasis on clinical signs, the pathological and bacteriological analysis, and molecular identification of the microorganisms as the key of the definitive diagnosis.

Stability evaluation of propolis topical bases for veterinary use

This study aimed to evaluate and select different dermatological bases incorporated with propolis for veterinary use as well as to analyze the chemical compounds of the propolis hydroalcoholic extract by LC-MS/MS. Thus, formulations were submitted to accelerated stability tests under different temperatures and to mechanical stress, and evaluated for the appearance, color, odor, pH, viscosity, spreadability, and the mean size of the dispersed globules from the internal phase during a period of three months. The creamy gel formulation showed satisfactory results for all the evaluated items with an excellent capability to incorporate the hydroalcoholic extract of propolis associated to the maintenance of its physicochemical properties. The propolis used in this study had been shown to possess antibacterial and antifungal in vitro activity against the main microorganisms responsible for such diseases. Therefore, the propolis creamy gel described here could be a promising formulation for use in the veterinary medicine.

Perfil de suscetibilidade antimicrobiana e presença do gene vapA em Rhodococcus equi de origem humana, ambiental e equina / Susceptibility profile of Brazilian Rhodococcus equi isolates to different antimicrobial classes and the presence of vapA gene

Rhodococcus equi é um micro-organismo intracelular facultativo, agente etiológico da rodococose, uma importante enfermidade que acomete principalmente potros com menos de seis meses de idade, causando a morte geralmente em decorrência de lesões pulmonares. Este agente também tem potencial zoonótico e emergiu como um patógeno oportunista no mundo, acometendo humanos imunocomprometidos, especialmente os transplantados e infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Entretanto, infecções por R. equi em hospedeiros hígidos tem sido relatadas, principalmente em crianças e idosos. Estudos tem mostrado um nível crescente na resistência de isolados de R. equi em relação aos antimicrobianos comumente utilizados no tratamento de animais e seres humanos infectados por este agente. A virulência deste pode estar associada a fatores como a cápsula de polissacarídeo, fosfolipase C e à enzima colesterol oxidase (fator equi). No entanto, uma proteína localizada em um plasmídeo, designada vapA, é essencial para a sobrevivência e replicação do agente em macrófagos. Com isso, os objetivos deste estudo foram avaliar o perfil de suscetibilidade de isolados de R. equi de diferentes fontes em relação aos antimicrobianos mais comumente utilizados na terapêutica animal e humana, bem como verificar a associação entre a presença do gene vapA e o índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA). Neste estudo, 67 isolados brasileiros de R. qui de diferentes fontes foram analisados: 30 provenientes de amostras clínicas de equinos, sete de humanos e 30 ambientais (seis do solo e 24 de fezes de equinos). Para avaliar o perfil de suscetibilidade dos isolados utilizou-se o método de disco difusão, sendo testadas 16 drogas de diferentes classes de antimicrobianos. As amostras clínicas de equinos apresentaram as maiores taxas de resistência à penicilina (86,7%) e lincomicina (30%). Além disso, foram também resistentes a macrolídeos (azitromicina a 6,7%, eritromicina a 6% e ...

Rhodococcus equi is a facultative intracellular bacterium and etiological agent of rodococosis, an important disease that affects specially foals under six months old and leading the death generally due to pulmonary lesions. R. equi also has zoonotic potential, and it has emerged as an opportunistic pathogen in the world, specially infecting solid organ transplant recipients and immunocompromised human patients, mainly those infected by human immunodeficiency virus (HIV). Additionally, R. equi infections by healthy hosts have been reported principally in children and elderly individuals. Studies have shown an increasing level of resistance of isolates of R. equi against antibiotics commonly used to treat affected animals and humans. The virulence of this agent is associated with a protein located on a plasmid, designated vapA, it is essential for survival and replication of R. equi within macrophages. The present study evaluated the susceptibility profile of R.equi isolates from different sources against the antimicrobials most commonly used to treat animals and humans, as well as the occurrence and association of vapA gene and the antimicrobial multiple resistance index (AMRI). Sixty-seven Brazilian isolates of R. equi from different sources were analyzed: 30 clinical samples of horses, seven of human and 30 of environmental (six from soil and 24 from horse feces). To evaluate the susceptibility profile of R. equi isolates, the Kirby Bauer method was performed by using 16 drugs of 11 distinct antimicrobials classes. Additionally, those samples were also resistant to macrolides (azithromycin 6.7%, erythromycin 6% and clarithromycin 3.3%) as well as rifamycin (13%). All human and environmental samples were sensitive to macrolides and rifamycin. However, environmental isolates demonstrated high levels of resistance to penicillin and chloramphenicol. Similarly, human isolates had high level of resistance to ceftiofur, lincomycin and sulfazotrim. AMRI...

Surto de listeriose sistêmica em chinchilas / Outbreak of systemic listeriosis in chinchillas

A listeriose é uma doença infecciosa que afeta uma grande variedade de espécies animais, causando septicemia, encefalite e aborto. As chinchilas são os animais mais susceptíveis à infecção sistêmica por Listeria monocytogenes. Este relato descreve um surto de listeriose sistêmica em uma criação de chinchilas da região central do Estado do Rio Grande do Sul, onde cerca de 16 por cento das chinchilas morreram. Na necropsia, havia múltiplos focos brancos, pequenos e de distribuição aleatória nas superfícies capsular e de corte do fígado e aumento de volume do linfonodo hepático. Histologicamente, observaram-se hepatite necrossupurativa e linfadenite supurativa multifocais, com numerosos bacilos intralesionais. L. monocytogenes foi o agente etiológico do surto de listeriose sistêmica, sendo o diagnóstico confirmado por meio das lesões de necropsia e histopatológicas, das características fenotípicas e genotípicas da bactéria e da técnica de imuno-histoquímica.

Listeriosis is an infectious disease, which affects a variety of animal species and cause septicemia, encephalitis and abortion. Chinchillas are the most susceptible animals to the systemic infection by Listeria monocytogenes. This report describes an outbreak of systemic listeriosis in a farm of chinchillas in the Central region of the Rio Grande do Sul state, Brazil. Mortality rate was about 16 percent. On necropsy, there were multiple random small white foci on the liver capsule and parenchyma and enlargement of the hepatic lymph node. Histologically, there were multifocal necro-suppurative hepatitis and suppurative lymphadenitis with numerous intralesional bacilli. L. monocytogenes was the etiology of the systemic listeriosis outbreak. The diagnosis was based on gross and microscopic lesions, genotypical and phenotypical characteristics and by immunohistochemistry technique.

Virulence factors and antimicrobial resistance of Escherichia coli isolated from urinary tract of swine in southern of Brazil / Fatores de virulência e resistência aos antimicrobianos de Escherichia coli isoladas do trato urinário de suínos do Sul do Brasil

The present study determined the molecular and resistance patterns of E. coli isolates from urinary tract of swine in Southern of Brazil. Molecular characterization of urinary vesicle samples was performed by PCR detection of virulence factors from ETEC, STEC and UPEC. From a total of 82 E. coli isolates, 34 (38.63 percent) harbored one or more virulence factors. The frequency of virulence factors genes detected by PCR were: pap (10.97 percent), hlyA (10.97 percent), iha (9.75 percent), lt (8.53 percent), sta (7.31 percent) sfa (6.09 percent), f4 (4.87 percent), f5 (4.87 percent), stb (4.87 percent), f6 (1.21 percent) and f41 (1.21 percent). Isolates were resistant to penicillin (95.12 percent), lincomycin (93.9 percent), erythromycin (92.68 percent), tetracycline (90.24 percent), amoxicillin (82.92 percent), ampicillin (74.39 percent), josamycin (79.26 percent), norfloxacin (58.53 percent), enrofloxacin (57.31 percent), gentamicin (39.02 percent), neomycin (37.8 percent), apramycin (30.48 percent), colistine (30.48 percent) and cefalexin (6.09 percent). A number of 32 (39.02 percent) E. coli isolates harbored plasmids.

O presente estudo teve por objetivo determinar os padrões moleculares e de resistência aos antimicrobianos de isolados de E. coli provenientes do trato urinário de suínos no Sul do Brasil. Os fatores estudados dividiram os patotipos ETEC, STEC e UPEC. Trinta e quatro (38,63 por cento) isolados avaliados apresentavam um ou mais dos fatores de virulência pesquisados. A freqüência dos genes de virulência detectados foram: pap (10,97 por cento), hlyA (10,97 por cento), iha (9,75 por cento), lt (8,53 por cento), sta (7,31 por cento) sfa (6,09 por cento), f4 (4,87 por cento), f5 (4,87 por cento), stb (4,87 por cento), f6 (1,21 por cento) e f41 (1,21 por cento). Os isolados foram resistentes à penicilina (95,12 por cento), lincomicina (93,9 por cento), eritromicina (92,68 por cento), tetraciclina (90,24 por cento), amoxacilina (82,92 por cento), ampicilina (74,39 por cento), josamicina (79,26 por cento), norfloxacina (58,53 por cento), enrofloxacina (57,31 por cento), gentamicina (39,02 por cento), neomicina (37,8 por cento), apramicina (30,48 por cento), colistina (30,48 por cento) e cefalexina (6,09 por cento). Trinta e dois (39,02 por cento) isolados de E. coli continham plasmídeos.

Sensibilidade antimicrobiana de bactérias isoladas de Jundiá (Rhamdia quelen) / Antimicrobial sensibility of bacterial isolates from Jundiá (Rhamdia quelen)

Objetivando o delineamento do perfil de sensibilidade dos agentes bacterianos causadores de enfermidades em peixes, 51 isolados bacterianos provenientes de Jundiá e pertencentes aos gêneros Acinetobacter spp. (8), Aeromonas spp. (15), Edwardsiella spp. (2), Enterobacter spp. (2), Klebsiella spp. (1), Plesiomonas spp. (5), Pseudomonas spp. (1), Staphylococcus spp.(11) e Vibrio spp. (6) foram testados frente aos antimicrobianos utilizados no tratamento de enfermidades em peixes. Dos 51 isolados bacterianos obtidos de exemplares de Jundiá (Rhamdia quelen) 51 (100 por cento) foram sensíveis a gentamicina, 49 (96,08 por cento) ao sulfazotrim, 47 (92,16 por cento) ao cloranfenicol, 43 (84,31 por cento), a tetraciclina, 43 (84,31 por cento) ao ácido nalidíxico, 31 (60,78 por cento) à nitrofurantoina, 22 (43,14 por cento) à eritromicina, 22 (43,14 por cento) à ampicilina, 15 (29,41 por cento) à espiramicina, 13 (25,50 por cento) à colistina e 5 (3 por cento) foram sensíveis a penicilina G. Com exceção de um isolado do gênero Staphylococcus spp., as bactérias analisadas no presente estudo foram resistentes a um ou mais agentes antimicrobianos testados. O conhecimento do perfil de sensibilidade das bactérias envolvidas em processos infecciosos nos peixes permitirá aos técnicos à adoção de uma antimicrobianoterapia racional, que contribuirá para o controle das enfermidades em Rhamdia quelen, sem causar grandes riscos à saúde pública e ao meio ambiente.(AU)

Aiming the evaluation of sensitivity profiles of pathogen bacteria responsible for fish diseases, 51 bacterial isolates from Jundiá (Rhamdia quelen) belonging to the genus Acinetobacter spp. (8), Aeromonas spp. (15), Edwardsiella spp. (2), Enterobacter spp. (2), Klebsiella spp. (1), Plesiomonas spp. (5), Pseudomonas spp. (1), Staphylococcus spp. (11), and Vibrio spp. (6), were tested against antimicrobial agents used for treatment of bacterial fish diseases. All samples were processed at the Laboratory of Bacteriology, Department of Preventive Veterinary Medicine, UFSM. From 51 bacteria isolated from jundiá fishes (Rhamdia quelen) 51 (100 percent) were sensitive to gentamycin, 49 (96,08 percent) to sulphazotrin, 47(92,16 percent) to chloramphenicol, 43 (84,31 percent) to tetracylin, 43 (84,31 percent) to naldixic acid, 31 (60,78 percent) to nitrofurantoin, 22 (43,14 percent) to erytromycin, 22 (43,14 percent) to ampicillin, 15 (29,41 percent) spiramycin, 13 (25,50 percent) to cholystin, and 5 (3 percent) to penicillin G. With exception of an isolate of Staphylococcus spp., the bacteria analyzed in the present study were resistant to one or more antimicrobial agents tested. Knowledge of the sensitivity profile of bacteria involved in infectious processes in fish will allow rational antimicrobial treatment that will contribute to the control of fish diseases in Rhamdia quelen without causing great risks to public health and the environment.(AU)

Molecular characterization of Rhodococcus equi isolates of horse breeding farms from an endemic region in South of Brazil by multiplex PCR

Rhodococcus equi is a gram-positive coco-bacillus and an intracellular opportunistic pathogen which causes pneumonia in foals. It is widely detected in environment and has been isolated from several sources, as soil, feces and gut from health and sick foals. The goal of this study was to characterize the epidemiological status (endemic, sporadic or no infection) of horse breeding farms from Bage County in South of Brazil, using a multiplex PCR. One hundred and eighteen R. equi isolates were identified by biochemical tests and submitted to a specie-specific and vapA multiplex PCR. These isolates were obtained from: three farms where the R. equi infection has been noticed, two farms where the disease has been not reported and one farm where the disease is frequent. All clinical isolates from horse breeding farms where the disease is endemic and/or sporadic were vapA-positive. None environmental isolates were vapA-positive. In three horse breeding farms with sporadic R. equi infection, 11.54 percent of the isolates from adult horse feces were vapA-positive. The multiplex PCR technique has proven to be effective for the molecular and epidemiological characterization of the R. equi isolates in horse breeding farms. An important finding in this study was the isolation of vapA-positive R. equi from adult horse feces, which is an evidence for other routes of dissemination of this pathogen in the farms.

Rhodococcus equi é um coco-bacilo gram positivo que causa pneumonia em potros. Trata-se de um patógeno oportunista amplamente detectado no ambiente e isolado de várias fontes, como solo, fezes e intestino de potros doentes e sadios. O presente estudo visa caracterizar a situação epidemiológica de criatórios eqüinos da região de Bagé, RS, Brasil, pela técnica de PCR multiplex. Cento e dezoito isolados de R. equi foram identificados por testes bioquímicos e, posteriormente, submetidos a um PCR multiplex para caracterização da espécie e da presença do gene vapA. Estes isolados eram provenientes de três haras com histórico da doença, dois haras onde não havia casos da doença e uma propriedade onde a infecção por R. equi é relatada frequentemente. Todos os isolados clínicos provenientes de haras onde a doença é endêmica e/ou esporádica foram vapA positivos. Nenhum isolado ambiental foi vapA positivo. Nos três haras onde a doença é esporádica, 11,54 por cento dos isolados de fezes de eqüinos adultos foram positivos para o gene vapA. A técnica de PCR multiplex mostrou-se efetiva para caracterização epidemiológica e molecular dos criatórios equinos, estando de acordo com o histórico da propriedade. Um fato relevante demonstrado pela aplicação desta técnica foi a detecção de R. equi vapA positivo nas fezes de eqüinos adultos. Esta observação pode pressupor que haja outras vias de disseminação da bactéria dentro de uma propriedade.

Atividade antibacteriana de extrato hidro-alcoólico de folhas de jambolão (Syzygium cumini (L. ) Skells) / Antibacterial activity of hydro-alcoholic extract leaves of jambolan (Syzygium cumini (L. ) Skells)

A atividade antimicrobiana de plantas medicinais tem sido pesquisada em diversas espécies, tanto no Brasil quanto em outros países. O objetivo deste trabalho foi o de avaliar a existência de efeito antibacteriano de extrato hidro-alcoólico a 10 por cento (m/v) de folhas de jambolão. Utilizaram-se 17 isolados bacterianos, Gram positivos e Gram negativos. A ação antibacteriana foi avaliada através da inoculação de placas de ágar Mueller Hinton, com um inóculo bacteriano de 1x10(6) ufc mL-1, onde se colocaram quatro discos de papel; o primeiro de antimicrobiano comercial e os demais embebidos em 25mL do extrato, de solução salina ou de etanol. As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas, sendo posteriormente realizada a leitura do diâmetro dos halos de inibição. O extrato inibiu o crescimento de 100 por cento das bactérias testadas e os isolados Gram positivos apresentaram um halo médio de 19,5mm, enquanto o dos Gram negativos foi de 18,8mm. Não houve inibição significativa de crescimento nos tratamentos com salina e etanol. Conforme os resultados deste estudo, o extrato testado apresenta atividade antibacteriana frente às amostras testadas, sem diferença de sensibilidade entre microrganismos Gram positivos e Gram negativos.

Edema maligno em suíno / Malignant edema in swine

Edema maligno em suíno é uma infecção fatal da musculatura esquelética e tecido subcutâneo de ruminantes e outras espécies animais, causada principalmente por Clostridium septicum, embora possa ocorrer em associação com Clostridium chauvoei, Clostridium sordellii, Clostridium novyi tipo A e Clostridium perfringens tipo A. O diagnóstico efetivo do edema maligno deve levar em consideração, além dos dados clínicos e lesões de necropsia, os achados microscópicos, isolamento do agente, imunofluorescência direta, imunoistoquímica e PCR. Embora haja poucos relatos de edema maligno em suínos na literatura, o C. septicum tem sido associado à maioria dos casos. Este trabalho relata um caso de mionecrose e edema subcutâneo em um leitão causado por C. septicum.